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測量葉綠素A的幾種方法比較

葉綠素是植物進(jìn)行光合作用的主要色素,是一類含脂的色素家族,位于類囊體膜。葉綠素吸收大部分的紅光和紫光但反射綠光,所以葉綠素呈現(xiàn)綠色,它在光合作用的光吸收中起核心作用。

葉綠素與生物總量有很強的關(guān)聯(lián)性。生物總量/生物量是自然科學(xué)中非常重要的參數(shù),研究和監(jiān)測它可指導(dǎo)人們的生產(chǎn)和生活。如下是一般生物量與葉綠素A的關(guān)系:生物量Biomass = 葉綠素a Chlorophyll a x 67 (數(shù)據(jù)來自Raschke 1993)。

測量方法

(1)人工顯微鏡檢查計算法

主要設(shè)備:顯微鏡

(2)分光光度法

主要設(shè)備:分光光度計,離心機,過濾器等

(3)高效液相色譜法(HPLC)

主要設(shè)備:液相色譜儀

(4)熒光分析法

主要設(shè)備:熒光法傳感器

優(yōu)缺點比較

(1)人工顯微鏡檢查計算法

優(yōu)點:所需設(shè)備簡單。

缺點:需要人工處理水樣,需要專業(yè)人員操作,人工計數(shù)重復(fù)性差,無法排除菌落和其它藻類干擾。必須在實驗室中進(jìn)行,無法在線實時監(jiān)測。

(2)分光光度法

優(yōu)點:有中國國標(biāo)HJ897-2017和國際標(biāo)準(zhǔn)ISO 10260 。重復(fù)性好。

缺點:測量和操作步驟復(fù)雜,需要專業(yè)儀器和專業(yè)人員,必須在實驗室中完成。各種標(biāo)準(zhǔn)中使用的公式不一樣,導(dǎo)致在不同標(biāo)準(zhǔn)測量方法下得到的水樣讀數(shù)不同。

(3)高效液相色譜法(HPLC)

優(yōu)點:分辨率高,低檢出限,準(zhǔn)確度高。

缺點:試用內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn),需要有害有機溶劑和昂貴的設(shè)備以及專家級別的操作人員在實驗室中進(jìn)行。無法在線監(jiān)測。

(4)熒光分析法

優(yōu)點:水樣無需預(yù)先處理,靈敏度高,低檢出限,重復(fù)性好,不破壞葉綠素細(xì)胞,可在線實時測量。

缺點:fDOM,濁度以及環(huán)境光對熒光測試干擾。水溫及pH對葉綠素A熒光效應(yīng)影響和干擾。

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